消毒灭菌方法

灭菌方法是指应用物理或化学等方法杀灭或除去一切存活的微生物增殖体或芽孢 , 使之达到无菌的方法。

( 1 ) 湿热灭菌法

物质在灭菌器内利用高压饱和蒸汽杀灭细菌。它灭菌能力强 , 是热力学灭菌中最有效和用途最广的方法。药品、药品的溶液、玻璃器械、培养基、无菌衣、敷料等在高温和湿热条件下不发生变化或损坏的物质 , 均可使用。

( 2 ) 干热灭菌法

物质在干燥空气中加热达到杀灭细菌的方法。

( 3 ) 除菌过滤法

利用细菌不能通过致密具孔滤材的原理 , 除去对热不稳定的药品溶液或液体物质中的细菌。

( 4 ) 辐射灭菌法

将灭菌产品暴露在由放射源辐射的 Y 射线或适宜的电子加速器发生的射线中 , 达到杀灭细菌的目的。

( 5 ) 环氧乙烷灭菌法

将产品暴露在充有环氧乙烷的环境中 , 达到灭菌的目的。

蒸汽 —湿热灭菌法

当温度超过细胞最佳生理活动的温度范围时 , 随着温度的升高 , 细胞代谢减缓 , 细胞的生长及繁殖最终停止。每种细胞的生理活动的温度均有一上限 , 一旦温度超过它的上限 , 起生命作用的蛋白质、酶及核酸会被永久性破坏 , 从而导致细胞发生不可逆转的死亡。

由于蒸汽 —湿热灭菌本身具备不破坏产品表面并容易重现等优点 , 被广泛应用于医药用品的除菌过程中。

所有蒸汽 —湿热灭菌周期的设计都以与饱和蒸汽直接接触为基础 , 饱和蒸汽是与液体状态的水保持平衡时的水蒸汽 , 因此饱和蒸汽只能存在于水汽的分界线上 , 即温度与压力之间的关系是固定的。灭菌效果是通过蒸汽与灭菌物品的热传递和产生冷凝水的水合作用来实现的。冷凝水是在蒸汽回到它的能量较低的液态时形成的。这种相变需要蒸汽潜热向周围环境的转化 , 这样就加热了

灭菌器和灭菌物品。选择一种适合的蒸汽灭菌方式 , 能在满足产品本身性能的情况下取得满意的灭菌效果 , 但是任

何一种灭菌方法 , 都必须在实际应用前予以验证。

蒸汽 —湿热灭菌验证

评价无菌保证工艺是否有效曾一度主要通过产品抽样进行无菌检验来判断。由于微生物在产品中的分布是不均匀的 , 且抽检样品的数量有限 , 故抽检的结果不能真实代表整批产品的无菌状态。国际上更为注重无菌保证工艺的设计是否合理、所用的设备与工艺是否经过充分的验证 , 在此基础上 , 切实按照验证后的工艺进行生产 ,这样才能保证灭菌 ( 无菌 ) 工艺的可靠性。

蒸汽 —湿热灭菌验证的目的 , 就是通过一系列验证试验提供足够的数据和文件依据 , 从而找到最有效最合理的灭菌参数 , 并把已经验证过的饱和蒸汽灭菌设备和灭菌工艺参数应用到药品生产的除菌过程中去 , 以证明用于药品生产过程中的每一台饱和蒸汽灭菌设备都能起到灭菌的效果 , 并且对不同灭菌物品的灭菌过程和灭菌效果具有可靠性和重现性 , 即验证结果必须证明生产中所采用的灭菌过程对经过灭菌的物品能够保证残存微生物污染的概率或可能性低于百万分之

世界卫生组织 GMP 、中国《药品生产验证指南》《药品生产验证指南》关于湿热灭菌设备验证中温度检测要求

( 1) 仪表校准:温度 ±0.5 ℃ , 时间 ± 1% 。

( 2) 校准过程:至少十个测点 , 三次空载舱室内温度分布测量各点间的温度差在 ± 1 ℃ ( 温度均匀性的要求 ) 。

( 3 ) 再验证: 定期再验证、改变性再验证。

欧洲标准 EN554 ( 关于高温蒸汽灭菌设备 )

( 1 ) 对传感器检定的要求

用于验证和日常控制、指示、记录的仪器都要被检定。验证用的仪器可以用来校准、检定设备上用于控制、指示、记录的仪器 , 用于校准的仪器的准确度应该是被校准的仪器的 1/ 3 。

(2) 性能合格测试技术要求和方法

①测试应该对新的、改进的产品、包装、装载类型、维护后的设备、调整的过程参数进行 , 除非有等效或已有参考装载的验证证明。

②测量空舱室热分布 , 温度传感器数量足够给出分布图 , 建议 12 支 / 米 m 3 。每个装载类型的包装或参考测试包都做热穿透测试 , 温度传感器放置在测试包中心 , 测试包要放置在舱室中最冷的地方 , 温度传感器的数量不少于空舱热分布测试 , 其中至少有一个传感器放置在设备控制、指示、记录温度计附近。至少三次测试以检查重复性。

③测试合格的参数要求

灭菌保持时间内 : 温度测量值在灭菌温度带内 ( 灭菌温度 ± 3 ℃ ) , 温度偏差。温度测量值波动度不超过 ±1 ℃ , 温度波动度。任何两个点温度测量值之差不超过 2 ℃ , 温度均匀度。对于舱室容积小于 800 升的 , 平衡时间不超过 15s ;舱室容积大于 800 升的 , 平衡时间不超过 30s 。